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全自動(dòng)核酸提取儀的洗脫和洗滌有什么區(qū)別?

更新時(shí)間:2022-07-13瀏覽:2946次
  全自動(dòng)核酸提取儀可以進(jìn)行液體分液、吸液等自動(dòng)完成,甚至能通過(guò)整合擴(kuò)增、檢測(cè)等功能,實(shí)現(xiàn)標(biāo)本提取、擴(kuò)增、檢測(cè)全自動(dòng)化。提取核酸只是其功能的一個(gè)應(yīng)用。
 
  全自動(dòng)核酸提取儀可以應(yīng)用在疾病控制中心、臨床疾病診斷、輸血安全、法醫(yī)學(xué)鑒定、環(huán)境微生物檢測(cè)、食品安全檢測(cè)、畜牧業(yè)和分子生物學(xué)研究等多種領(lǐng)域。以磁珠為載體,利用磁珠在高鹽低PH值下吸附核酸,在低鹽高PH值下與核酸分離的原理,再通過(guò)移動(dòng)磁珠或轉(zhuǎn)移液體來(lái)實(shí)現(xiàn)核酸的整個(gè)提取純化過(guò)程。


 

在核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室拿到樣本之后,進(jìn)行核酸檢測(cè)時(shí),首先要做的就是使用自動(dòng)核酸提取儀將樣本中的核酸提取出來(lái),提取出的核酸直接關(guān)系到后續(xù)的檢測(cè),一般核酸提取的主要步驟分為四步:裂解、吸附、洗滌和洗脫,每一步出現(xiàn)問(wèn)題都會(huì)影響磁珠的提取效率。
 
  洗滌是去除DNA以外的RNA、蛋白質(zhì)等雜質(zhì)。關(guān)系到核酸的純度,磁棒的振蕩幅度和混合時(shí)間會(huì)影響洗滌效率。磁棒振蕩幅度太小或混合時(shí)間太短,有雜質(zhì)殘留在磁珠上會(huì)影響磁珠吸附核酸的能力。振蕩太劇烈或時(shí)間太長(zhǎng),會(huì)丟失部分核酸或造成核酸的斷裂、降解,得率下降。
 
  洗脫是解離吸附在磁珠上的DNA,得到純度和濃度均很高的DNA,直接影響核酸得率,影響洗脫效率的因素有磁珠的干燥程度以及洗脫溫度和時(shí)間。磁珠未充分晾干,可能會(huì)有醇類等雜質(zhì)殘留,影響后續(xù)PCR反應(yīng)。
 
  磁珠過(guò)分干燥,核酸可能會(huì)干結(jié)在磁珠上,導(dǎo)致洗脫效率下降。適當(dāng)提高洗脫溫度和時(shí)間,有利于核酸從磁珠上游離下來(lái),時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或溫度過(guò)高,核酸有可能會(huì)降解,需要把握其中的平衡。

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